如何防止交叉污染？阳性对照材料的分装、储存与使用操作指南

　　阳性对照材料是实验中用于验证检测方法有效性、判定结果可靠性的核心标准物质，其携带的目标病原体或活性成分易引发交叉污染，干扰实验结果准确性。防止交叉污染需围绕分装无菌化、储存隔离化、使用规范化三大原则，建立全流程管控体系，具体操作指南如下：

　　一、阳性对照材料的分装：无菌操作，源头防污染

　　分装是防控交叉污染的首道防线，需在生物安全柜（BSC）内完成，避免材料与环境、操作人员及其他实验样本接触。

　　1.分装前准备

　　-提前30分钟开启生物安全柜紫外灯消毒，通风10分钟后使用；操作人员穿戴防护服、无菌手套、口罩与护目镜，严格执行手消毒流程。

　　-准备无菌冻存管、移液器、吸头（带滤芯）等器具，所有器具需经高压蒸汽灭菌或γ射线灭菌，避免器具携带杂质或微生物。

　　-依据实验需求，将对照材料按单次使用量进行分装，避免反复冻融与多次取样，减少污染风险。

　　2.分装操作规范

　　-开启生物安全柜内照明灯与风机，保持气流稳定；将阳性对照母液、无菌冻存管放置于安全柜操作区，严禁放置在回风口气栅上方。

　　-使用带滤芯的无菌吸头吸取母液，移液器垂直操作，避免液体溅出；每吸取一次更换一个吸头，严禁吸头重复使用。

　　-分装完成后，立即旋紧冻存管盖，用封口膜密封管口，贴好标签，标注材料名称、浓度、分装日期、有效期与生物危害等级。

　　-操作结束后，用75%乙醇擦拭安全柜内壁、台面及器具表面，关闭安全柜时先关风机，再关紫外灯，做好操作记录。

　　二、阳性对照材料的储存：分类隔离，降低污染风险

　　阳性对照材料的储存需遵循分区、分类、专人管理原则，防止与阴性样本、其他实验材料混放导致交叉污染。

　　1.储存分区管理

　　-实验室冰箱/液氮罐需划分阳性对照专用储存区，与阴性样本区、普通试剂区严格隔离，张贴醒目的生物危害标识。

　　-不同类型的对照材料（如病毒、细菌、核酸）分开存放，高致病性材料需单独存放于双锁冰箱内，由专人负责保管，严格执行领用登记制度。

　　2.储存条件控制

　　-根据材料特性选择合适的储存温度：短期储存（1周内）可置于2–8℃冷藏；长期储存（数月至数年）需置于-20℃或-80℃冷冻，核酸类阳性对照可加入稳定剂后保存，避免降解。

　　-冻存管需放置在密封的冻存盒内，防止冰箱内冷凝水渗入或材料泄漏；液氮储存时需使用液氮专用冻存管，做好防液氮渗漏防护。

　　-定期检查储存设备温度，做好温度记录；发现温度异常时，及时转移阳性对照材料，避免材料失活或污染扩散。
 

　　三、阳性对照材料的使用：规范操作，杜绝污染扩散

　　阳性对照材料的使用环节是交叉污染的高发点，需严格遵循专用器具、分区操作、及时消毒的要求。

　　1.使用前准备

　　-领用对照材料时，核对标签信息，检查包装是否完好、有无泄漏；若发现包装破损，立即进行无害化处理，严禁使用。

　　-准备专用的移液器、吸头、离心管等器具，严禁与处理阴性样本的器具混用；实验台面铺设一次性无菌垫，便于后续清洁消毒。

　　2.使用操作规范

　　-阳性对照的加样操作需最后进行，避免先处理阳性材料再处理阴性样本导致污染。

　　-加样过程中保持移液器垂直，避免液体飞溅；若发生溢洒，立即用75%乙醇覆盖污染区域，静置15分钟后擦拭，更换污染的实验垫与手套。

　　-实验结束后，所有接触过阳性对照的器具需单独放置于生物危害垃圾袋内，经高压蒸汽灭菌后再清洗或丢弃；实验台面、移液器用75%乙醇消毒。

　　3.废弃物处理

　　-阳性对照材料的剩余液、废弃吸头、离心管等废弃物，需放入专用生物危害垃圾袋，密封后进行高压灭菌处理，严禁随意丢弃。

　　-实验产生的废液需经消毒处理达标后，方可排入实验室污水处理系统。

　　阳性对照材料的交叉污染防控是一个全流程的系统工程，通过严格执行分装无菌化、储存隔离化、使用规范化的操作要求，可最大限度降低污染风险，保障实验结果的准确性与可靠性。